ÖZET

Amaç:

Gerçekleştirdiğimiz çalışmada sağlıklı mukozanın AIEC referans ırkı Escherichia coli (E. coli) LF82 bakterisinin adhesiv ve invasiv özelliklerine olan etkisini araştırdık. Bu amaçla belli oranlarda hücre kültür ortamı ve sindirim kanalının farklı bölgelerinden (kolon ve ileum) elde edilen mukozal içeriği barındıran özel ortamlar tasarladık.

Yöntemler:

Mukozal media (Muc-M) adını verdiğimiz bu ortamların varlığında AIEC referans ırkı E. coli LF82 bakterisinin I-407 hücrelerini enfekte etme kabiliyetini in vitro olarak test ettik. Çeşitli hücre kültür ortamı oranlarından oluşan Muc-M veya M63 minimal media ve barsağın farklı bölgelerinden elde edilen mukozal içerikler hücre enfeksiyonu deneyleri ve biyofilm oluşumu deneyleri için tasarlanmıştır.

Bulgular:

Elde edilen bulgular barsak sisteminin farklı bölgelerinden elde edilen ortamların, LF82 invazyonunu farklı oranlarda etkilediğini göstermiştir. Dolayısıyla bu çalışma E. coli’nin barsakta yerleşim yeri ile ilgili yapılacak gelecek çalışmalara katkı sunabilecek veriler sunmuştur.

Sonuç:

Sonuçlar bu ortamların bakterinin hücreleri enfekte etme yüzdesini kontrole nazaran düşürdüğünü gösterdi. Özellikle ileumdan köken alan mukozal ortamın LF82 invazyonunu büyük oranda inhibe ettiği görüldü. Diğer taraftan kolondan köken alan mukozal ortamın bakteri invazyonunu kontrol grubuna göre ancak yarı yarıya azalttığı görüldü.

References

Rutgeerts P, Goboes K, Peeters M, Hiele M, Penninckx F, Aerts R, et al. Effect offaecal stream diversion on recurrence of Crohn’s disease in the neoterminal ileum. Lancet 1991;338:771-4.

Sartor RB. Microbial influences in inflammatory bowel diseases. Gastroenterology 2008;134:577-94.

Schultsz C, Moussa M, van Ketel R, Tytgat GN, Dankert J. Frequency of pathogenic and enteroadherent Escherichiacoli in patients with inflammatory bowel disease and controls. J Clin Pathol 1997;50:573-9.

Baumgart M, Dogan B, Rishniw M, Weitzman G, Bosworth B, Yantiss R, et al. Culture independent analysis of ileal mucosa reveals a selective increase in invasive Escherichia coli of novel phylogeny relative to depletion of Clostridiales in Crohn’s disease involving the ileum. ISME J 2007;1:403-18.

Kotlowski R, Bernstein CN, Sepehri S, Krause DO. High prevalence of Escherichia coli belonging to the B2+D phylogenetic group in inflammatory bowel disease. Gut 2007;56:669-75.

Boudeau J, Glasser AL, Masseret E, Joly B, Darfeuılle-Mıchaud A. Invasive Ability of an Escherichia coli Strain Isolated from the Ileal Mucosa of a Patient with Crohn’s Disease. Infect Immun 1999;67:4499-509.

Carvalho FA, Barnich N, Sauvanet P, Darcha C, Gelot A, Darfeuille-Michaud A. Crohn’s disease-associated Escherichia coli LF82 aggravates colitis in injured mouse colon via signaling by flagellin. Inflamm Bowel Dis 2008;14:1051-60.

Johansson ME, Ambort D, Pelaseyed T, Schütte A, Gustafsson JK, Ermund A, et al. Composition and functional role of the mucus layers in the intestine. Cell Mol Life Sci 2011;68:3635-41.

Lang T, Hansson GC, Samuelsson T. Gel-forming mucins appeared early in metazoan evolution. Proc Natl Acad Sci U S A 2007;104:16209-14.

Audie JP, Janin A, Porchet N, Copin MC, Gosselin B, Aubert JP. Expression of human mucin genes in respiratory, digestive, and reproductive tracts as certained by in situ hybridization. J Histochem Cytochem 1993;41:1479-85.

Weiss AA, Babyatsky MW, Ogata S, Chen A, Itzkowitz SH. Expression of MUC2 and MUC3 mRNA in human normal, malignant, and inflammatory intestinal tissues. J Histochem Cytochem 1996;44:1161-6.

Hansson GC, Johansson ME. The inner of the two Muc2 mucin dependent mucus layers in colon is devoid of bacteria. Gut Microbes 2010;1:51-4.

Larsson JM, Karlsson H, Sjovall H, Hansson GC. A complex, but uniform O-glycosylation of the human MUC2 mucin from colonic biopsies analyzed by nanoLC/MSn. Glycobiology 2009;19:756-66.

Aygun H, Karamese M, Ozic C, Uyar F. The effects of mucosal media on some pathogenic traits of Crohn’s disaese-associated Escherichia coli LF82. Future Microbiol 2018;13:141-9.

Darfeuille-Michaud A, Boudeau J, Bulois P, Neut C, Glasser AL, Barnich N, et al. High prevalence of adherent-invasive Escherichia coli associated with ileal mucosa in Crohn’s disease. Gastroenterology 2004;127:412-21.

Seksik P, Rigottier-Gois L, Gramet G, Sutren M, Pochart P, Marteau P, et al. Alterations of the dominant faecal bacterial groups in patients with Crohn’s disease of the colon. Gut 2003;52:237-42.

Vasquez N, Mangin I, Lepage P, Seksik P, Duong JP, Blum S, et al. Patchy distribution of mucosal lesions in ileal Crohn’s disease is not linked to differences in the dominant mucosa-associated bacteria: a study using fluorescence in situ hybridization and temporal temperature gradient gel electrophoresis. Inflamm Bowel Dis 2007;13:684-92.

Boudeau J, Barnich N, Darfeuılle-Mıchaud A. Type-1 pili-mediated adherence of Escherichia coli strain LF82 isolated from Crohn’s disease is involved in bacterial invasion of intestinal epithelial cells. Mol Microbiol 2001;39:1272-84.

Gork AS, Usui N, Ceriati E, Drongowski RA, Epstein MD, Coran AG, et al. The effect of mucin on bacterial translocation in I-407 fetal and Caco-2 adult enterocyte cultured cell lines. Pediatr Surg Int 1999;15:155-9.

FVB/N Irkı Farelerden Elde Edilen İleal Mukozal Ortamın Escherichia coli LF82 Türü Bakterilerin İnvazyonu Üzerine Olan İnhibe Edici Etkisi

ÖZET

References